血漿是通過在全血中添加抗凝劑防止凝固后分離得到的上清液。若采血后不及時(shí)處理,血液中的細(xì)胞代謝、凝血因子激活或物理震蕩可能引起溶血、細(xì)胞破裂或目標(biāo)分析物(如酶、細(xì)胞因子)降解,從而對(duì)后續(xù)檢測(cè)(如ELISA、生化分析)造成嚴(yán)重干擾。
關(guān)鍵處理步驟(避免干擾)
1、立即混勻抗凝管
采血后必須立刻將采血管輕柔顛倒混勻5–10次,確??鼓齽ㄈ?/font>EDTA、肝素)均勻分布,防止血液凝固形成微小凝塊。未充分混勻可能導(dǎo)致局部凝血,影響后續(xù)離心和檢測(cè)準(zhǔn)確性。
2、盡快離心分離血漿
應(yīng)在采血后30分鐘內(nèi)進(jìn)行離心,最佳條件為2–8℃、1000×g離心15分鐘,迅速分離上清液(血漿),減少血細(xì)胞與血漿接觸時(shí)間。延遲處理會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞代謝活躍,改變葡萄糖、乳酸等不穩(wěn)定成分的濃度。
3、控制溫度與避光保存
若不能立即離心,應(yīng)將樣本置于4℃冷藏,但不得超過4小時(shí)。某些對(duì)溫度敏感的項(xiàng)目(如兒茶酚胺)需全程冷鏈操作。
4、避免溶血與反復(fù)凍融
操作中禁止劇烈震蕩或使用過細(xì)針頭抽吸,以防紅細(xì)胞破裂釋放內(nèi)含酶類,干擾ELISA等檢測(cè)系統(tǒng)。分離后的血漿若需長期保存,應(yīng)分裝至-80℃,避免反復(fù)凍融。
以下表格總結(jié)了血漿樣本采血后關(guān)鍵處理措施及其防干擾機(jī)制:
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處理步驟 |
操作要點(diǎn) |
干擾風(fēng)險(xiǎn) |
防范機(jī)制 |
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抗凝混勻 |
采血后立即顛倒5–10次 |
微小凝塊形成 |
確??鼓齽┏浞肿饔?/font> |
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快速離心 |
30分鐘內(nèi),2–8℃,1000×g,15分鐘 |
細(xì)胞代謝導(dǎo)致分析物變化 |
縮短血細(xì)胞與血漿接觸時(shí)間 |
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溫度控制 |
臨時(shí)存放于4℃,不超過4h |
成分降解(如乳酸↑、pH↓) |
抑制細(xì)胞代謝活性 |
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避免溶血 |
輕柔操作,不劇烈振蕩 |
非特異性顯色(如HRP干擾ELISA) |
防止血紅蛋白釋放 |
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分裝保存 |
-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融 |
蛋白質(zhì)聚集、酶失活 |
減少物理損傷與變性 |
補(bǔ)充說明:對(duì)于特殊用途如cfDNA檢測(cè),推薦使用專用采血管(如Streck管),可在5–8℃穩(wěn)定全血達(dá)72小時(shí),但仍建議盡早分離血漿以保障質(zhì)量。
為最大程度避免干擾,建議建立標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(SOP),包括使用正確的抗凝管類型(如EDTA管用于多數(shù)分子檢測(cè))、嚴(yán)格控制離心時(shí)間和溫度,并做好樣本標(biāo)記與分裝記錄。






